Abstract Xanthomonas species infect many important crops and cause huge yield loss. These pathogens deliver transcription activator-like (TAL) effectors into the cytoplasm of plant cells. TAL effectors move to host nuclei, directly bind to the promoters of host susceptible genes, and activate their transcription. However, the molecular mechanisms by which TAL effectors induce host transcription remain unclear. We herein demonstrated that TAL effectors interacted with the SIMILAR TO RCD ONE (SRO) family proteins OsSRO1a and OsSRO1b in nuclei. A transactivation assay using rice protoplasts indicated that OsSRO1a and OsSRO1b enhanced the activation of the OsSWEET14 promoter by the TAL effector AvrXa7. The AvrXa7-mediated expression of OsSWEET14 was significantly reduced in ossro1a mutants. However, the overexpression of OsSRO1a increased disease resistance by up-regulating the expression of defense-related genes, such as WRKY62 and PBZ1. This was attributed to OsSRO1a and OsSRO1b also enhancing the transcriptional activity of WRKY45, a direct regulator of WRKY62 expression. Therefore, OsSRO1a and OsSRO1b appear to positively contribute to transcription mediated by bacterial TAL effectors and rice transcription factors.

Plant nucleotide-binding leucine-rich repeat receptors (NLRs) initiate immune responses by recognizing pathogen effectors. The rice gene Xa1 encodes an NLR with an N-terminal BED domain, and recognizes transcription activator-like (TAL) effectors of Xanthomonas oryzae pv. oryzae (Xoo). Our goal is to elucidate the molecular mechanisms controlling the induction of immunity by Xa1. We used yeast two-hybrid assays to screen for host factors that interact with Xa1 and identified the AP2/ERF-type transcription factor OsERF101/OsRAP2.6. Molecular complementation assays were used to confirm the interactions among Xa1, OsERF101, and two TAL effectors. We created OsERF101-overexpressing and knockout mutant lines in rice and identified genes differentially regulated in these lines, many of which are predicted to be involved in regulation of response to stimulus. Xa1 interacts in the nucleus with the TAL effectors and OsERF101 via the BED domain. Unexpectedly, both the overexpression and knockout lines of OsERF101 displayed Xa1-dependent, enhanced resistance to an incompatible Xoo strain. Different sets of genes were up- or down-regulated in the overexpression and knockout lines. Our results indicate that OsERF101 regulates the recognition of TAL effectors by Xa1, and functions as a positive regulator of Xa1-mediated immunity. Further, an additional Xa1-mediated immune pathway is negatively regulated by OsERF101.

The U-box type ubiquitin ligase PUB44 positively regulates pattern-triggered immunity in rice. Here, we identify PBI1, a protein that interacts with PUB44. Crystal structure analysis indicates that PBI1 forms a four-helix bundle structure. PBI1 also interacts with WRKY45, a master transcriptional activator of rice immunity, and negatively regulates its activity. PBI1 is degraded upon perception of chitin, and this is suppressed by silencing of PUB44 or expression of XopP, indicating that PBI1 degradation depends on PUB44. These data suggest that PBI1 suppresses WRKY45 activity when cells are in an unelicited state, and during chitin signaling, PUB44-mediated degradation of PBI1 leads to activation of WRKY45. In addition, chitin-induced MAP kinase activation is required for WRKY45 activation and PBI1 degradation. These results demonstrate that chitin-induced activation of WRKY45 is regulated by the cooperation between MAP kinase-mediated phosphorylation and PUB44-mediated PBI1 degradation.

Plants are constantly exposed to pathogens in their immediate environment. Plants sense the invasion of pathogens by recognizing the components including peptide fragments derived from pathogens, known as pathogen-associated molecular patterns (PAMPs). Plants also produce immunogenic peptides called phytocytokines that regulate immune responses. These molecules are recognized by pattern recognition receptors (PRRs) at plasma membrane. Activated PRRs induce a variety of immune responses including production of reactive oxygen species (ROS), induction of Ca2+ influx and activation of mitogen activated protein kinases (MAPKs). Pattern-triggered immunity (PTI) wards off microbes and pests. In this review, we summarize recent our advances in understanding how the peptide fragments are generated and perceived by plant PRRs at cell surface, and the activated PRRs transduce the downstream immune signaling.

Luciferases have been widely utilized as sensitive reporters to monitor gene expression and protein-protein interactions. Compared to firefly luciferase (Fluc), a recently developed luciferase, Nanoluciferase (NanoLuc or Nluc), has several superior properties such as a smaller size and stronger luminescence activity. We compared the reporter properties of Nluc and Fluc in rice (Oryza sativa). In both plant-based two-hybrid and split luc complementation (SLC) assays, Nluc activity was detected with higher sensitivity and specificity than that with Fluc. To apply Nluc to research involving the photoperiodic regulation of flowering, we made a knock-in rice plant in which the Nluc coding region was inserted in-frame with the OsMADS15 gene, a target of the rice florigen Hd3a. Strong Nluc activity in response to Hd3a, and in response to change in day length, was detected in rice protoplasts and in a single shoot apical meristem, respectively. Our results indicate that Nluc assay systems will be powerful tools to monitor gene expression and protein-protein interaction in plant research.

Plants remember information related to previous pathogen infection as immunological memory, leading to a primed state of enhanced immune responses. In this issue of Cell Host & Microbe, Gong et al. (2019) discover that immune priming is established through crosstalk between cell-surface co-receptors upon MAMP perception.

We isolated various kinds of mutants participating in the biosynthesis of endosperm starch by the MNU treatment of fertilized egg cells in japonica rice cultivars. There were at least 6 mutant loci lowering amylose content including the wx locus. These low amylose mutations altered the amylose content without affecting the amylopectin structure. The amylose content did not affect the initiation of gelatinization, but influenced greatly the swelling of gel, indicating that amylose content affects the swelling power of gel and the termination of gelatinization. BEIIb mutation decreased specifically the short chains with DP less than 17 in amylopectin whereas BEI mutation was characterized by a significant decrease in long chains with DP longer than 38 and short chains with DP 12 to 23, suggesting that BEIIb and BEI contributes to the synthesis of A chains, and B, and B3 chains of amylopectin, respectively. Notable alteration on the chain length profile was not observed in BEIIa mutation. Each BE mutation showed distinct effect on the thermal properties of endosperm starch. The sug2 mutation lowering the expression level of PUL increased shorter chains of amylopectin and accumulated a significant amount of the water-soluble polysaccharides as well as ISA (sugl ) mutation. The fl o2 mutation decreased simultaneously the expression levels of some of the enzymes including BEI, PUL and GBSS, suggesting that the wild type Flo2 gene probably encodes a regulatory protein that modulates the expression of the genes involved in starch biosynthesis. Some mutants involved in the biosyn thesis of ADP-glucose were also isolated.

There is increasing evidence for occurrence of programmed cell death (PCD) in plant development, plant-microbe interaction and cells under a variety of stresses. Recent studies on PCD in plants indicate that various features of apoptosis in mammals are shared with plant PCD: there is evidence for DNA fragmentation, oligonucleosomal DNA laddering, morphological changes in plant cells. These studies suggest that PCD plays an important role in the life of plants as in animals. Despite the wide occurrence of PCD in plants, signaling and components of the machinery for PCD are largely unknown. We recently identified the Rac family of the small GTP-binding protein as a key regulator of PCD in plants. Also, the analysis of lesion mimic mutants of rice indicates that some mutants have biochemical alterations in early steps of signaling in disease resistance. The major challenge in the study of plant PCD in the near future is the identification of signaling molecules and components of machinery involved in plant PCD. This will enable us to better understand this important cellular process of plants.

The recessive floury-2 (flo-2) locus of rice (Oryza sativa L.), which is located on chromosome 4, causes a strong reduction in expression of the gene encoding an isoform of branching enzyme RBE1 in immature seeds 10 d after flowering. Mapping of the RBE1 gene demonstrated the localization on rice chromosome 6, suggesting that the wild-type Floury-2 (Flo-2) gene regulates RBE1 gene expression in trans. However, reduced expression of the genes encoding some other starch-synthesizing enzymes, including another isoform of branching enzyme RBE3 and granule-bound starch synthase, was also found in the flo-2 seeds. In spite of the low level of RBE1 gene expression in the immature seeds of the flo-2 mutants, the RBE1 gene was equally expressed in the leaves of the wild type and flo-2 mutants. Thus, these results imply that the Flo-2 gene may co-regulate expression of some of the genes participating in starch synthesis possibly in a developing seed-specific manner.

三次三染色体植物は正常の染色体組に加え，転座染色体を1本過剰にもつ異数体であり，多くの植物で細胞遺伝学的な材料として用いられている.三次三染色体植物を利用することにより，各標識遺伝子の座乗染色体腕や，動原体の位置，そして連鎖地図の方向を明らかにすることが可能となる.本実験ではイネの三次三染色体植物の作出を試み，その同定を行った. イネの三次三染色体植物を作出する方法として，組織的な三系交雑，すなわち〔一次三染色体植物/相互転座系統//正常二倍体〕を行った(Fig.1).花粉親である相互転座系統には一次三染色体植物の過剰染色体に一致する染色体が転座しているものを用い，そのF₁から転座ヘテロー次三染色体植物を選抜して正常二倍体を交配した(Table3).選抜は三系交雑F₁での形態を調査して行った(Table4).選抜個体は，自殖次代の分離調査と減数分裂期の染色体対合様式の観察により三次三染色体植物として同定した.

病原菌が、植物で感染拡大をする際、宿主細胞内にエフェクターと呼ばれるタンパク質を分泌する。エフェクターは、植物の免疫誘導を抑制したり、宿主の遺伝子発現を制御して菌の増殖環境を整える機能をもつ。このようにエフェクターは病原菌の病原力の根源となっており、いかにエフェクターの機能を抑制するかが病原菌の増殖抑制において重要な課題となっている。本研究では、エフェクターと相互作用するタンパク質ドメインを、エフェクタートラップドメイン（ETD）として利用し、ETDがエフェクターの機能を阻害するかについて解析を行う。得られた成果をもとに、ETDを利用して、病原菌の感染力を弱体化される次世代型の耐病性技術の開発を行うことを目的としている。 植物の重要病害を引き起こすXanthomonas属やRalstonia属の病原菌は、TALエフェクターをもつ。TALエフェクターは、宿主の核で転写因子として働き、菌の増殖に都合がいい宿主遺伝子を発現させる、最も重要な病原性因子である。TALエフェクターが、NB-LRR型病原菌認識受容体Xa1がもつBEDドメインと相互作用することを見出したため、BEDを発現させた形質転換イネとシロイヌナズナを作製した。本年度、BED発現イネに白葉枯病菌を感染させたが、顕著な病原菌の増殖抑制は見られなかった。一方、シロイヌナズナでは、病原菌の抑制効果が観察され、その有効性が示唆された。

植物に重要病害を引き起こすXanthomonas属やRalstonia属の病原菌は、植物の核において転写因子として働くTALエフェクターを植物細胞内に送り込む。TALエフェクターは、菌の増殖に有利に働く遺伝子を制御し、感染を拡大させることが知られている。一方、イネ品種黄玉がもつNB-LRR型受容体であるXa1は、TALエフェクターを認識して防御反応を誘導することが知られている。しかし、植物のNB-LRR受容体については、それらによる免疫活性化機構についてもあまり理解されていない。そこで、本研究では、Xa1による免疫誘導機構を解析することで、NB-LRR型受容体による免疫活性化機構を明らかにすることを目的としている。 本年度は、Xa1と相互作用する因子として見出したRAP転写制御因子に関して解析を進め、RAPがTALエフェクターと直接的に相互作用することを見出した。また、細胞内においてXa1とTALエフェクターの複合体形成が見られるものの、直接な相互作用は検出できていない。そのため、Xa1は、RAPを介してTALエフェクターを認識し、免疫を活性化することが示唆された。また、前年度の解析により、RAPの過剰発現体とノックアウト変異体が共に強い抵抗性を誘導することが明らかになった。本年度、詳細な遺伝子発現解析を行い、RAPの過剰発現体とノックアウト変異体では、異なるタイプの遺伝子が活性化されていることがわかった。これらの結果は、前年度に提唱した「RAPによって抑制されるイネの遺伝子が存在し、その遺伝子は、Xa1依存型抵抗性を正に制御している」というモデルと一致した。

植物は、細胞膜上に存在する病原菌認識受容体を介して、病原菌の構成成分を認識し、迅速な免疫反応を誘導する。その免疫反応の誘導において、MAPキナーゼカスケードが極めて重要な働きをしていることが知られているが、植物では受容体からMAPキナーゼにどのように情報が伝達されているかが明らかになっていない。これまでに、病原菌の構成成分であるキチンを認識する受容体CERK1によりリン酸化される因子として細胞質リン酸化キナーゼであるPBL27を同定し、さらにPBL27がMAPカスケードの起点となるMAPKKKaと相互作用することが明らかとなった。さらに、pbl27変異体およびmapkkka変異体を用いた遺伝学的解析により、CERK1-PBL27-MAPKKKa-MKK4/MKK5-MPK3/MPK6のシグナル伝達系が示唆された。そこで、CERK1、PBL27、MAPKKKaの組換えタンパク質を調製し、PBL27によるMAPKKKaのリン酸化を解析したところ、PBL27がMAPKKKaのC末端側をリン酸化すること、さらにそのリン酸化反応には、PBL27がCERK1によるリン酸化により活性化されていることが必要であることがわかった。さらに、PBL27によってリン酸化されるMAPKKKaの６個のアミノ酸残基を特定し、それらのアミノ酸をアラニンに置換した変異タンパク質はmapkkka変異体を相補できないことがわかった。この結果は、MAPKKKaの活性化にはPBL27によるリン酸化が必須であることを示唆している。さらに、MAPKKKaがMKK4とMKK5の活性化モチーフをリン酸化することが明らかとなり、CERK1-PBL27-MAPKKKa-MKK4/MKK5-MPK3/MPK6のシグナル伝達系を生化学的にも証明することに成功した。

セロトニンは、動物では神経伝達物質として知られているが、植物における機能は殆ど明らかになっていない。我々は、イネからセロトニン合成酵素遺伝子を同定し、セロトニンが防御反応に関わっていることを明らかにした。本研究により、シロイヌナズナにおいて、セロトニンが、防御遺伝子の発現、カロースの形成、MAPKの活性化などの免疫応答を誘導することが明らかになり、セロトニンが免疫誘導因子として機能していることが明らかになった。

Xoo3222がターゲットとする宿主免疫因子の探索により、OsPUB44が同定された。Xoo3222は、OsPUB44のU-boxドメインに結合することにより、OsPUB44のユビキチンリガーゼ活性を阻害した。また、イネ細胞を26Sプロテオソームの阻害剤で処理すると、OsPUB44が蓄積することから、OsPUB44のタンパク質量がユビキチン化により制御されていると考えられる。実際、Xoo3222を発現するイネ培養細胞では、OsPUB44のタンパク質量が増加しており、これはXoo3222がOsPUB44の自己ユビキチン化を阻害していることを示唆している。植物免疫におけるOsPUB44の機能を明らかにするため、RNAi法によりOsPUB44の発現を抑制した培養細胞と植物体を作成した。RNAi培養細胞では、病原菌の構成成分であるキチンやペプチドグリカンに応答した防御応答が抑制された。また、RNAi植物では、イネ白葉枯病菌に対する抵抗性が抑制されていた。このように、OsPUB44はイネの免疫誘導において、ポジティブレギュレーターとして機能していることが示された。さらに、OsPUB44による免疫誘導の分子機構を明らかにするため、OsPUB44のARMドメインに結合する因子を探索し、機能未知なOsPUB44 interactor1 (PBI1)を同定した。BiFC法を用いた解析により、OsPUB44とPBI1は細胞内で相互作用することが明らかになった。そこで、PBI1の機能を明らかにするため、RNAi法を用いてPBI1の発現抑制体を作成した。

植物は、病原菌が感染した際、それぞれの病原菌を構成する因子を、病原菌に特有な分子パターン(PMAPs)として認識し、迅速な抵抗性反応を誘導する。このPAMPsの認識は、植物自身がもつ病原菌認識受容体を介して行われる。受容体が認識した情報は速やかに伝達され、様々な防御応答を誘導する引き金となるが、その信号伝達機構は不明である。我々は、白葉枯病菌が宿主の免疫反応を阻害するために、植物細胞内に分泌するエフェクターを利用して、新規な免疫因子OsRLCK2を単離した。OsRLCK2の過剰発現体では、キチンに応答した免疫応答が向上し、またOsRLCK2が細胞膜に局在することから、OsRLCK2が細胞膜に存在するキチン認識受容体であるOsCERK1と相互作用することが示唆された。そこで、酵母TwoHy brid法、免疫沈降法、BiFC法を用いて解析したところ、OsRLCK2は細胞膜上でOsCERK1と相互作用していることが明らかになった。また、OsRLCK2の抗体を作成し、生化学的な解析を行ったところ、キチンに応答してOsRLCK2がリン酸化されることが明らかになった。OsCERK1の細胞質ドメインは、タンパク質キナーゼドメインであることから、キチンを認識した活性化したOsCERK1によりOsRLCK2がリン酸化されている可能性が示唆された。さらに、OsRLCK2は、他の病原菌認識受容体とも相互作用することが明らかになった。これらの結果は、OsRLCK2が病原菌認識受容体からの信号を受け、それを下流に伝達することで、様々な防御応答を誘導していると考えられる。

植物免疫因子の機能解明により、環境にやさしい新規な耐病性植物を開発する

耐病性反応において、イネの低分子量Gタンパク質RacファミリーのOsRac1がシグナル伝達の分子スイッチとして機能していることを明らかにしていが、その分子機構の詳細は不明だった。本研究で、OsRac1と複合体を形成するタンパク質を探索し、抵抗性タンパク質、パターン認識受容体、シャペロン、コシャペロン、足場タンパク質、活性酸素を生成するNADPHオキシダーゼなどを同定した。我々は、OsRac1を含むタンパク質複合体を「Defensome」と名付けた。さらに、Defensomeがイネの植物免疫に中枢を担うタンパク質複合体であることを明らかにした。

植物は、それぞれの病原菌を構成する因子を、病原菌に特有な分子パターン(PAMPs)として認識し、迅速な抵抗性を誘導する。本プロジェクトでは、PAMPs誘導抵抗性における低分子量Gタンパク質Rac/Ropの活性化機構を解析し、PAMPs誘導抵抗性が、PAMPsを認識する受容体キナーゼ-Rac/Rop活性化因子(GEF)-Rac/Ropによる信号伝達により調節されていることを明らかにした。

申請者はRacファミリーのイネ低分子量Gタンパク質OsRac1が病原体の侵入認識から抵抗性発現に至る過程で信号伝達の鍵因子として機能していることを明らかにしてきた。しかし、耐病性反応時にOsRac1を活性化するGDP-GTP交換因子(GEF)については明らかになっていない。本研究課題では、耐病性反応におけるRacGEFを同定し、Racの活性化機構を解析することを目的としている。近年、植物の特有の機能ドメインであるPRONEドメインがGEF活性を有することが明らかにされた。イネには11個のPRONEドメインをもつ遺伝子(OsRacGEF1-11)が存在する。本研究プロジェクトでは、これらのRacGEFについて、分子生物学的および生化学的な解析を行ない、OsRac1のGEFの同定を試みた。11個の全てのRacGEFについて、組換えタンパク質を調製し、OsRac1に対するGEF活性を調べた。その結果、全てのOsRacGEFがOsRac1に対してGEF活性を示したが、特にOsRacGEF7とOsRacGEF8が強いGEF活性を示すことが明らかとなった。また、OsRacGEFの細胞内の局在部位を調べるため、蛍光タンパク質と融合させたOsRacGEFをイネ細胞内で発現させ、局在解析を行った。その結果、RacGEF4は核に、RacGEF7、RacGEF8、RacGEF9は細胞膜と細胞質に、RacGEF10は細胞質に、RacGEF11は微小管に存在することが明らかとなった。OsRac1は細胞膜に多く存在することがわかっており、RacGEF7、RacGEF8、RacGEF9がOsRac1と共局在しているど考えられた。また、RacGEF7とRacGEF8の過剰発現体では、恒常的に防御遺伝子の発現が誘導されており、この2つの遺伝子が耐病性反応に関わるOsRac1のGEFとして働いている可能性が示された。

耐病性シグナル伝達経路の解明を目的として、病害応答情報伝達系の主要因子の一つとしてイネの過敏感細胞死の制御に関与するGタンパク質の役割を初めて明らかにし、それらの性状に関する重要な知見を得た。さらに、形質転換植物・細胞による発光レポーター遺伝子を指標とした病害応答遺伝子発現モニタリングシステムを確立し、抵抗性誘導剤の評価スクリーニングや、病害応答変異体選抜等に応用可能な実験系を構築した。また、病害抵抗性と密接に関連すると想定されるDNA傷害応答性発現遺伝子の発現制御について詳しく解析し、誘導抵抗性遺伝子発現との関連を明らかにした。興味深い結果としては、銅イオンによるこれら3種類の病害応答性プロモーターの応答性に基づき、環境調和型農薬としての銅剤の作用機作に関する有意義な知見が得られた。さらに、耐病性遺伝子発現の主要転写制御因子であるNPR1の作用機作や、耐病性遺伝子発現と関連する組織特異性を制御する新規GRASタンパク質が転写制御因子として機能することを初めて明らかにした。一方、エリシター応答性プロモーターと関連転写制御因子に関する研究を重点的に実施し、転写制御因子であるタバコのNtWRKY1,2,4がERF3遺伝子プロモーターのW-box配列と相互作用することを示し、一過的発現解析によりNtWRKY1,2,4がW-boxを介して転写活性化因子として機能することを明らかにした。NtWRKY4遺伝子は、低レベルで恒常的に発現しており、傷害によって発現が変化しないが、NtWRKY1と2は傷害処理によって迅速な発現誘導を示した。また、ERF3遺伝子の発現はERF3によって抑制されることも示唆された。高等植物の遺伝子発現制御系として関連因子群が詳細に明らかにされている例は希で、これらは耐病性シグナル伝達の末端として重要な転写制御に関する知見として最も詳細な研究として高い評価が得られている。

植物は、抵抗性遺伝子産物を介して病原体の侵入を認識し様々な防御反応を誘導する。近年、抵抗性遺伝子産物は大きな複合体を形成し、病原体の多様なシグナルを認識している可能性が示唆されている。しかし、抵抗性遺伝子産物がどのような因子と複合体を形成し、どのようにシグナルを伝達しているかについては、ほとんど明らかになっていない。本研究では、イネといもち病菌の系を用いて病原体認識の総合的なメカニズムの解明を試みる。いもち病抵抗性遺伝子Pi-aの候補として考えられたRPR1遺伝子は、核酸結合部位(NBS)とロイシンリッチリピート(LRR)をもつ典型的な抵抗性遺伝子をコードしている。RPR1の過剰発現体は、Pi-aに依存した過敏感反応を誘導しないものの、親和性いもち病菌に対して抵抗性を誘導し、防御遺伝子の発現が上昇していた。これは、RPR1がPi-aを相補することが出来なかったものの、過剰発現により抵抗性シグナルを伝達できることが明らかになった。一方、抵抗性誘導のキーレギュレーターとして機能している低分子量Gタンパク質OsRac1と相互作用する因子の探索により、5種のNBS-LRRタンパクが同定された。そこで、OsRac1とRPR1の相互作用を調べたところ、OsRac1はRPR1のNBSドメインと強く結合することが明らかになった。このことは、OsRac1がRPR1と複合体を形成し、認識シグナルを下流に伝達していることが示唆された。他のNBS-LRRとOsRac1の相互作用を調べたところ、多くのNBSドメインがOsRac1と相互作用することが明らかになった。また、OsRac1は他の抵抗性遺伝子産物の調節因子と相互作用することが明らかになっており、NBS-LRR構造をもつ抵抗性遺伝子産物はOsRac1と複合体を形成し、病原体認識および抵抗性誘導を行っていることが示唆された。

イネいもち病菌に対する抵抗性関連遺伝子を単離するため、植物の抵抗性遺伝子の間で高度に保存されている核酸結合部位の配列を用いたPCRクローニングにより抵抗性遺伝子の核酸結合部位に似た領域をもつイネ遺伝子を単離した。イネいもち病抵抗性準同質遺伝子系統を用いた解析により、単離した遺伝子は、既知のいもち病抵抗性遺伝子Pi-taとの関連が示唆された。そこで、この遺伝子の全塩基配列を決定したところ、この遺伝子は核酸結合部位とロイシンリッチリピートをもつ抵抗性遺伝子の1つのクラスに属することがわかった。この遺伝子を強制発現させた形質転換イネを作成し、いもち病菌の接種試験をおこなったが、顕著な抵抗性の向上は見られなかった。また、詳細なマッピングの結果、この遺伝子はPi-taとは異なることがわかった。しかし、この研究の過程で、抵抗性反応時に一過的に発現が誘導される遺伝子を単離した。この遺伝子はテルペン合成酵素の相同性をしめし、新規な抵抗性関連遺伝子であることがわかった。現在、この遺伝子を利用した抵抗性育種を検討している。